中文字幕久久亚洲I a中文在线播放I 国产欧美综合色I 西西人体直播I 少女在线观看动漫在线观看I 久久久久久 国产I 国产黄在线免费观看I 久久动漫亚洲I 一区二区三区在线观看wwwI 又黄又爽又刺激的视频I 亚洲va在线va天堂I 在线播放精品一区二区三区I 在线观看免费高清视频97I 豆花视频成人I 国产自线自拍I 欧美国产乱子伦I 欧美日本色图I 国产精品网红福利I 永久黄网站色视频免费无下载I 亚洲视频 碰碰I 川上优的av在线一区二区I 欧美特黄一区I 黄色+视频+卡1+国产I 国内偷窥港台综合视频在线播放I 在线可以看的av网址I sao浪受的饥渴日常I 国产精品一区二区av影院萌芽I 日韩中文字幕在线精品I 精品制服美女丁香I 亚洲午夜精品国产I 狠狠干夜夜爱I 久久综合丝袜日本网I 美女粉嫩玉足福利

技術文章

提取細胞質和細胞核蛋白的操作步驟點擊次數:7734 更新時間:2020-05-08

在細胞實驗中提取細胞質和細胞核蛋白的操作步驟:

 

1.決定細胞生長狀態(tài),細胞生長狀態(tài)應該是80%或者更好;

 

2.用離心機以1500r/min離心5min;

 

3.棄上清液,用等體積的冷PBS洗細胞,像步驟2那樣,反復3次;

 

4.根據估計的沉淀量加入5倍體積的isotonic lysis buffer到細胞顆粒中,使細胞溫和懸浮,盡量避免泡沫;

 

5.加入裂解液lysis buffer在懸浮的細胞中,并放在冰上15min讓細胞膨脹,可以通過顯微鏡檢查;

 

6.對于細胞實驗中膨脹的細胞,加入10%的IGEPAL CA-630使*后的濃度達到0.3%,混勻,加的時候要溫和;

 

7. 立即離心(量大的可以用1.5mlde EP管,以5500r/min離心30s;量大的可以用50ml的管子以5500r/min離心2min);

 

8.轉移上清液(細胞質蛋白)到一個新的冷凍管中;

 

9.用懸浮顆粒5倍體積的isotonic lysis buffer懸浮細胞,并混勻;

 

10.用離心機離心細胞懸浮液,以1500r/min離心5min,移掉上清液;

 

11.用2/3倍體積的extraction buffer懸浮顆粒;

 

12.把管子放置在震蕩混勻器上,以700r/min,15min震蕩混勻,接著以1400r/min,15min,整個過程要仔細,避免泡沫產生;

 

13.以9400r/min離心15min,離心完后轉移上清液到一個新的冷凍離心管中;

 

14.分成幾份用液氮冷凍,并且保存起來(長期保存應放在-80℃上,短期保存要放在-20℃上)。

電話:
13788993509
13788995069
021-64133189
傳真:
021-64129208
陳小姐點擊這里給我發(fā)消息
徐小姐點擊這里給我發(fā)消息
朱小姐點擊這里給我發(fā)消息
 
安全聯(lián)盟站長平臺

滬公網安備31011802005622號

化工儀器網

推薦收藏該企業(yè)網站